Nkwadebe na ihe achọrọ nke Chicken Adrenomedullin (ADM) reagent

Apr 06, 2021

1. Serum: coagulation na ụlọ okpomọkụ maka 10-20 min, centrifugation maka 20 min na ọsọ nke 2000-3000 r.pm. Na-anakọta nke ọma na centrifuge ọzọ ma ọ bụrụ na mmiri ozuzo na-egosi n'oge nchekwa.

2. Plasma: Ekwesịrị ịhọrọ EDTA ma ọ bụ sodium citrate dị ka anticoagulant dị ka ihe ndị a chọrọ. Mgbe ngwakọta maka nkeji 10-20, centrifuge maka nkeji 20 na ọsọ nke 2000-3000 r.pm. Na-anakọta nke ọma nke ọma wee kechie ọzọ ma ọ bụrụ na mmiri ozuzo na-etolite n'oge nchekwa.

3. Urine: kpokọta na tube na-adịghị mma, centrifuge maka nkeji 20 na ọsọ nke 2000-3000 r.pm. Na-anakọta nke ọma nke ọma wee kechie ọzọ ma ọ bụrụ na mmiri ozuzo na-etolite n'oge nchekwa. Ọkpụkpụ thoracic na nke afọ, mmejuputa ntụaka mmiri cerebrospinal.

4. Cell omenala supernatant: na-anakọta na akpali mmasị tube mgbe ịchọpụta exudatory components. Centrifuge maka nkeji 20 na ọsọ nke 2000-3000 r.pm. Na-anakọta supernatant nke ọma. Mgbe a na-achọpụta ihe ndị dị na sel, a na-eji PBS (pH 7.2-7.4) gbasaa nkwusioru cell, na mkpokọta cell ruru ihe dịka 1 nde / ml. Site na oyi na-agbaze ugboro ugboro, a na-ebibi mkpụrụ ndụ ndị ahụ ma wepụta ihe ndị dị na intracellular. Centrifuge maka nkeji 20 na ọsọ nke 2000-3000 r.pm. Na-anakọta supernatant nke ọma. Ọ bụrụ na mmiri ozuzo na-etolite n'oge nchekwa, centrifuge ọzọ.

5. Tissue specimen: Mgbe ibelata ihe atụ, tụọ ya. Tinye ụfọdụ ego nke PBS, PH7.4. Nchekwa ngwa ngwa n'ime mmiri mmiri nitrogen maka ojiji emechaa. Nlereanya na-anọgide na okpomọkụ nke 2-8 degrees mgbe agbaze. A na-agbakwunye ụfọdụ PBS (PH7.4), ma ejiri aka ma ọ bụ homogenizer mee ihe atụ ahụ kpamkpam. Centrifuge maka nkeji 20 na ọsọ nke 2000-3000 r.pm. Na-anakọta supernatant nke ọma. Kewaa otu maka nnwale ma tinye nke fọdụrụ maka idobere.

6. Ekwesịrị ịwepụta ihe nlele ozugbo enwere ike ịnakọta. Ekwesịrị ịme mmịpụta dịka akwụkwọ ndị dị mkpa si dị, a ga-eme nnwale ozugbo enwere ike mgbe mmịpụta gasịrị. Ọ bụrụ na enweghị ike ịme ule ahụ ozugbo, enwere ike ịchekwa ihe nlele ahụ na -20 degrees , mana enwere ike ịzere oyi na oyi ugboro ugboro.

7. Enweghị ike ịchọpụta ihe nlele nwere NaN3, n'ihi na NaN3 na-egbochi ọrụ HRP.